CTAB抽提液(RNase free)

测定血清中的某些酶，如CK，离体(采集血液)后很容易失活。失活的原因是酶活性中心的活性基因巯基(一SH)被氧化造成的。只有通过适当的还原作用才能重新开始。如CK—NAC检测试剂盒即含有CK活化剂，名为N一乙酰半胱氨酸。实验研究证明，NAC对血清中已失活的CK活化过程约需180 S。这就是CK测定为什么要延迟时间较长的理论依据。在AST，ALT采用IFCC推荐方法测定时需要磷酸吡哆醛预活化。需要强调：含有活化剂的生化试剂，其测定酶活性的结果要高些。ELISA检测试剂盒是用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎病毒抗体ELISA检测。CTAB抽提液(RNase free)

怎样减少检测试剂盒误差？严控反应时间，反应时间过长，酶失活；反应时间过短，酶结合物不能与血清中的微生物抗原抗体充分结合，生成物结构松散不牢固，容易洗掉，都可能造成假阴性。注意检测试剂盒保存期，过保存期的试剂不能使用。评估试剂的实用性，试剂的稳定与否，对准确率的高低到头重要。在试剂启用前，应进行阴、阳对照及样品反复比照试验，判定试剂符合要求后方可使用。严格掌握显色时间，显色时间过短，加入终止液反应终止后，底物结合物的量过少，易出现假阴性。超过显色要求时间后显色，应判为假阳性，这可能与试剂本身有关。加显色剂后立即显色，不可报阳性，这可能是本底显色的结果。BES缓冲液(1mol/L,pH7.2)当往某些溶液中加入一定量的酸和碱时，有阻碍溶液pH变化的作用，称为缓冲作用。

缓冲溶液的缓冲能力：在缓冲溶液中加入少量强酸或强碱，其溶液pH值变化不大，但若加入酸，碱的量多时，缓冲溶液就失去了它的缓冲作用。这说明它的缓冲能力是有一定限度的。缓冲溶液的缓冲能力与组成缓冲溶液的组分浓度有关。0.1mol·L-1HAc和0.1mol· 　 L-1NaAc组成的缓冲溶液，比0.01mol·L-1HAc和0.01mol·L-1NaAc的缓冲溶液缓冲能力大。关于这一点通过计算便可证实。但缓冲溶液组分的浓度不能太大，否则，不能忽视离子间的作用。组成缓冲溶液的两组分的比值不为1∶1时，缓冲作用减小，缓冲能力降低，当c（盐）/c（酸）为1∶1时△pH较小，缓冲能力大。不论对于酸或碱都有较大的缓冲作用。缓冲溶液的pH值可用下式计算：此时缓冲能力大。缓冲组分的比值离1∶1愈远，缓冲能力愈小，甚至不能起缓冲作用。对于任何缓冲体系，存在有效缓冲范围，这个范围大致在pKaφ（或pKbφ）两侧各一个pH单位之内。

样品的溶血、脂血、黄疸等会对测定结果产生非化学反应的干扰。因此，应根据溶血、脂浊、黄疸的光谱吸收特性，采用双波长或多波长的检测模式，并在结果计算中扣除因溶血、脂血、黄疸引起的影响，减少干扰程度。每种待测物都有一个可测定的浓度或活性范围，样品结果若超过此范围，分析仪将显示结果超过范围的提示。表示试剂已经变质，应更换合格试剂。使用连续监测法、两点法测定酶活性时，若酶活性非常高，底物接近被耗尽，吸光度上升或下降会超过某一吸光度变化范围，监测期的吸光度将偏离线性，使测定结果不可靠。液体试剂是指药物分散在液体分散介质中组成的内服或外用的液态制剂。

使用方法：1， 固定细胞或组织样品，经过固定后，适当洗涤除去固定剂。如果需要进行免疫荧光染色，可先进行免疫荧光染色，染完毕后再进行染色。如果不需要进行其它染色，则直接进行染色。 2， 对于贴壁细胞或组织切片，加入少量染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞，至少加入待染色样品体积 3 倍的染色液，混匀。 3， 室温染色 5-10 分钟。 4， 吸除染色液，生理盐水洗涤 2-3 次，每次 3-5 分钟。 5， 置于荧光显微镜下观察，激发波长 360-400nm。 溶液注意事项： dapi 被普遍认为具有致性，操作时应戴手套，并避免交叉污染。 本产品需避光，并尽量避免反复冻融。荧光染料都存在淬灭问题，建议染色后尽量当天完成检测。 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光衰减封片剂。室温条件，水平转子离心400g，离心30-40min，可见细胞分层。中性红指示剂(6.8-8.0)

丁胺卡那霉素给药说明：5%葡萄糖注射液或其他灭菌稀释液100—200ml。CTAB抽提液(RNase free)

pH缓冲溶液的类型与作用：pH缓冲溶液包括两大类：标准缓冲溶液和普通缓冲溶液。标准缓冲溶液主要用在酸度计测量溶液pH值时的仪器校正和定位，要求数值准确、精确。因此对试剂纯度、浓度准确性、温度等都有严格要求，这类缓冲溶液有专门的化学试剂商品，可以购买配制，也可以用优级纯试剂按资料的配比配制。普通缓冲溶液主要用于化学分析和仪器分析中要控制一定pH值的测定过程中。几乎所有的EDTA络合滴定都必须在一定的pH范围内进行，因此，需要加入pH缓冲溶液，例如，测定铅、锌用到HAc缓冲溶液，测定钙、镁、锌用到氨缓冲溶液。又如，氧化还原滴定中，碘量法测铜要用到NH4HF2，碘量法测砷、锑要加NaHCO3。CTAB抽提液(RNase free)